Zielgruppe

Das Seminar richtet sich an HPLC-Anwender, welche die LC-MS-Detektion in ihrem Labor nutzen oder in diese leistungsstarke Technik einarbeiten möchten. Sie lernen die Grundlagen und Besonderheiten der Kopplungstechniker und erfahren, wie quantitative Ergebnisse zuverlässig ermittelt werden.

Lernziele & Nutzen

Die LC-MS-Technik ist eine der wichtigsten Kopplungs-techniken in der analytischen Chemie. Besonders häufig werden die Trennmethoden wie RP-LC (Reversed-Phase) und HILIC (Hyhlic Interaction Liquid Chromatography) mit der Massenspektrometrie kombiniert. Doch welche Methode eignet sich für welche Probe? Hier eine Eingruppierung:

• HILIC-MS: ideal für polare Moleküle wie Metabolite
• RP-LS-MS: besonders für Peptide und Polyphenole in pflanzlichen Extrakten

Neben den bewähren Kombinationen bietet auch die MS-MS-Kopplung entscheidende Vorteile, insbesondere bei der Strukturaufklärung und Quantifizierung von Molekülen.

In diesem Seminar erfahren die Teilnehmer die Vor- und Nachteile einzelner Ionisierungsmodi und erhalten Tipps für die Wahl von mobiler Phase und Puffersystemen. Das Ziel dieses Seminars ist es, Grundkenntnisse in der LC-MS zu vermitteln und durch praxisnahe Tipps den Einstieg in diese Technik zu erleichtern.

Einführung in die LC-MS-Kopplungstechnik

• Grundlagen der Massenspektrometrie
  • Isotopenmuster, Auflösung, Massengenauigkeit
  • Ionisierung: ESI, APCI
  • Unterschiedliche Gerätetypen und deren Einsatzmöglichkeiten
  • Framentierung (MS/MS)
• Grundlagen der HPLC-MS-Kopplung
  • stationäre Phasen (u.a. RP und HILIC)
  • mobile Phasen (Lösungsmittel, Additive)
  • Weitere Einflussfaktoren

LC-MS in der Praxis

• Einführung in die Methodenentwicklung
  • Optimierung von LC- und MS-Parametern (Auswahl von Säule, Lösungsmitteln und Additiven)
  • Probenaufarbeitung (SEP, PP, LLE u.a.)
  • Kalibrierung und Wartung
  • LC-MS-Fehlersuche
• Auswertung und Applikationsbeispiele
  • Mehrfachladungen, Adduktbildung
  • Isotopenmuster
  • Exakte Masse
  • Positiver/Negativer Messmodus
  • Methoden der Quantifizierung
  • Messmodi (SIM, MRM, PRM, u.a.)
  • Anwendungsbeispiele

Zielgruppe

• Wissenschaftler und Labormitarbeitende mit LC-MS (teilweise auch GC-MS) Erfahrung
• Anwender/innen, die Massenspektren auswerten und interpretieren
• Einsteiger/innen und Fortgeschrittene, die mehr Sicherheit im Umgang mit MS-Daten gewinnen möchten.
   

Das bring Ihnen das Seminar

• Verstehen statt Raten: Massenspektren logisch interpretieren
• Klarheit über Ionisierung, Fragmentierung und Massenanalysatoren
• Sicherheit bei der Zuordnung von Peaks, Addukten und Ladungszuständen
• Souveräne Bewertung von LC-MS(/MS)- und GC-MS-Daten
• Systematische Interpretation von MS-Daten zur Identifikation und Quantifizierung von Analyten
• Richtiger Einsatz von MS-Software und Spektrenbibliotheken
• Erkennen und Vermeiden typischer Fehler bei der MS-Auswertung
• Mehr Sicherheit und Effizienz im Laboralltag

Einführung und Wiederholung von MS-Grundlagen

• Ionisierungsverfahren
• Welche Typen von Massenanalysatoren für welche Analyse?
• Fragmentierung
• Aufbau und Terminologie von MS-Spektren

Grundlagen der Interpretation von MS-Spektren

• Bewertung verschiedener Spektren und Peaks (Addukte, Mehrfachladungen)

• Exakte Masse und Elementarzusammensetzung

• Besonderheiten durch das Ionisierungsverfahren

Auswertung und Interpretation von Spektren

• Manuelle und software-gestützte Auswertung von MS-Spektren von kleinen Molekülen (Stickstoffregel, Fragmentierung) und Proteinen&Peptiden

• Abgleich mit Spektrenbibliotheken

• Interpretation von quantitativen Daten